omegabiotek D6943-01說明書
E.Z.N.A.® Plasmid Mini Kit I, (V-spin)
使用旋轉微型柱從1-5mL細菌培養物中分離質粒DNA
SKU：D6943-01類別：細菌質粒標簽：D6943-00，D6943-01，D6943-02
EZNA®PlasmidMini Kit I設計用于在30分鐘或更短的時間內從1-5 mL細菌培養物中分離出多達30μg的高質量質粒DNA。使用HiBind®MiniColumn技術將質粒DNA純化簡化為三個快速步驟：結合，洗滌和洗脫。純化的質粒DNA可立即用于各種下游應用，例如常規篩選，限制酶消化和手動/自動熒光DNA測序。
EZNA®質粒微型試劑盒可提供2種不同類型的色譜柱：V型旋轉色譜柱帶有附加蓋（D6943），而Q型離心色譜柱則無蓋（D6942）。在使用和應用方面，這些柱子是相同的。兩種色譜柱均可與真空或離心方案一起使用。
僅供研究使用。不用于診斷過程。
| 特征 | 產品規格 |
|---|---|
| 下游應用 | 克隆; 桑格排序，轉型等 |
| 起始材料 | 1-5mL LB培養物 |
| 質粒類型 | 高拷貝，低拷貝，粘粒DNA |
| 處理模式 | 手動，離心或真空 |
| 吞吐量 | 1-24 |
| DNA結合技術 | 硅膠微型旋轉柱 |
| 裂解液清除方法 | 離心 |
| 處理時間 | <30分鐘 |
| 產量 | 高拷貝數15-25μg; 低拷貝數0.1-5μg |
| 特別說明 | 停用酵母質粒試劑盒的替代方案 |
| 項目 |
|---|
| HiBind®DNA微型柱 |
| 2 mL收集管 |
| 解決方案一 |
| 解決方案II |
| 解決方案III |
| HBC緩沖液 |
| DNA洗滌緩沖液 |
| RNase A. |
| 洗脫緩沖液 |
DNA濃度比較
圖1. 根據制造商推薦的方案進行用pGEM載體轉化的4mLDH5α培養物。通過NanoDrop®2000c的光密度測量確定質粒DNA濃度。總洗脫體積為50μL。
超卷曲DNA
圖2. 根據標準方案分離用pGEM載體轉化的1mLDH5α培養物。在1％瓊脂糖凝膠上分析5μL洗脫物質粒DNA。
Nanodrop的DNA定量分析
表1. 用pGEM載體轉化的1mLDH5α培養物。通過NanoDrop®2000c的光密度測量確定質粒DNA濃度。總洗脫體積為50μL。
桑格測序
表2. 用EZNA質粒Mini Kit I純化的質粒DNA用于5μLSanger測序反應。在Applied Biosystems 3730XL上分析DNA。
內毒素水平
表3. 質粒DNA制備物中的內毒素。按照每個制造商推薦的方案，從0.8mL LB培養物中分離質粒DNA。用Thermo Scientific的Pierce LAL Chromogenic Endotoxin Quantitation Kit測定內毒素水平。
